简介:
本试剂盒采用高效、专一结合核酸的离心吸附柱和独特的缓冲系统。样品裂解后,DNA在高盐条件下与硅胶膜结合,在低盐、高pH值时DNA从硅胶膜上洗脱下来。具有简便、快捷的特点。组织微量基因组DNA 提取&PCR 试剂盒是一种可以快速从组织、小鼠尾部、单根毛发、细胞培养液、唾液、精液等动物组织中提取微量基因组DNA后通过PCR扩增进行检测的试剂盒。使用该试剂盒可以在 12min 内完成基因组 DNA 提取,整个操作过程不需要离心、无需酚/ 氯仿抽提等繁杂抽提步骤。提取的基因组DNA无蛋白、核酸酶或其它杂质的污染,完全去除污染和抑制剂,可以直接用于 PCR 扩增、定量分析等实验。提取的基因组 DNA 置于 4℃至少保存 3 个月, 可用于 50-100 个 PCR 反应。
产品特点:
操作简单:应用该试剂盒无需离心、酚抽提等复杂步骤, 且整个流程只需12min。 高灵敏度:可用于提取微量样品的基因组,且可直接用于 PCR 扩增。 ¨
应用广泛:可从多种动物组织中提取基因组应用于各种相关PCR 分析。
样品类型 | 所需数量 |
组织 | 1-5 mg |
细胞 | 100-10,000 个 |
唾液 | 20 μl |
毛发 | 1-3 根带毛囊毛发 |
操作方法:
1. 取 50 μl Tissue-A Buffer 置于 200 μl 的 EP 管中。
2. 取样:不同的组织取样方法不同
a. 动物组织:以高压灭菌的手术剪取新鲜或冰冻的动物组织 1-5 mg,不要超过 5 mg(重要), 立即置于 Tissue-A Buffer 中,短暂涡旋务必使 Tissue-A Buffer 覆盖组织。
b. 小鼠尾部:以高压灭菌的手术剪取小鼠尾部,不要超过 5 mg,立即置于 Tissue- A Buffer 中,短暂涡旋务必使 Tissue-A Buffer 覆盖小鼠尾部组织。
c. 毛发:取 1-3 根带有毛囊(重要)的毛发,取其根部置于50 μl 的Tissue-A Buffer 中,短暂涡旋务必使 Tissue-A Buffer 覆盖毛发根部。
d. 唾液或口腔黏液:吸取 15 μl 的唾液或口腔黏液置于50 μl 的Tissue-A Buffer 中,短暂涡旋以充分混匀。
e. 细胞培养液:吸取 15 ul 的细胞培养液(100-10,000 个细胞)置于 50 μl 的 Tissue-A Buffer 中,短暂涡旋以充分混匀。
3. 将加有样品和 Tissue-A Buffer 的 EP 管置于PCR仪上95°C 加热 10min。
4. 加热结束后,加入 50 μl 的 Tissue-B Buffer,然后用移液器吹吸混匀,切勿剧烈振荡。
5. 取步骤 4 所得溶液作为基因组模板,应用后面进行 PCR 扩增。
储存:
(1)长期保存请储存于-20℃,避免反复冻融,可保存一年。
(2)若短期使用请置于 4℃可放置3 个月。
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