简介:
PCR 级血液基因组DNA直提试剂盒是用于快速获得全血或冻存血DNA的试剂,使用该试剂获得高纯度的基因组DNA可直接用于 50 个以上的下游PCR和定量 PCR 扩增。该制品特别适用于临床检测试验和高通量血液样品的PCR检测。
用途:
快速诊断及检测 DNA 测序和基因分型
操作方法 I:
(哺乳动物无核红细胞全血)
(1)实验操作前请将 10X 红细胞裂解液用无菌水稀释到 1X,如 1ml的10X 红细胞裂解液中加入9ml无菌水。
(2)在 1.5ml EP 管中加入 600μl 的 1X 红细胞裂解液,向红细胞裂解液中加入 100μl 抗凝全血,上下颠倒混合均匀,室温放置 2min,13000rpm 离心 2min,倒掉上层红色液体,留取底部白细胞层。
(3)再次加入 400μl 的 1X 红细胞裂解液,上下颠倒 5~10 次。 13000rpm离心 1min,倒掉上层红色液体,留取底部白细胞层。
(4)通常底部残留 40μl 液体,漩涡震荡(或枪头吹打)重悬白细胞层,至无块状物。加入 20μl DA Blood Solution,漩涡 5s 混合均匀。并置于 75°C 水浴中放置 10min。孵育完毕后加入 10μl DB Blood Solution,漩涡 5s 混合均匀,即可用于下游 PCR 扩增。通常每 50μl PCR体系加入 1μl 制备的该基因组 DNA 即可。
操作方法 II:
(禽类有核红细胞全血)
(1)直接取 2.5μl 抗凝禽血加入到 47.5μl 水中,漩涡5s混合均匀。
(2)加入 20μl DA Blood Solution,漩涡 5s 混合均匀。并置于 75°C 水浴中放置 10min。孵育完毕后加入 10μl DB Blood Solution,漩涡 5s 混合均匀,即可用于下游 PCR 扩增。通常每 50μl PCR 体系加入 1μl 制备的该基因组 DNA 即可。
储存:
若短期使用请置于 4℃可放置 6 个月;若长期保存请置于 -20℃,避免反复冻融,可保存五年。
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