Supersmart 安全核酸染料(10000×) (ZS-M18006)

简 介：

DNA Safe Dye (10000×)核酸染料是一种EB (Ethidium bromide，溴化乙锭)的升级换代产品，用于凝胶中DNA、RNA等核酸的染色。DNA Safe Dye (10000×)具有安全(致突变性极低且检测不到显著的细胞毒性)、远高于 EB的灵敏度、稳定性好等优点，同时不需要脱色。由于DNA Safe Dye (10000×)和 EB 有相同的光谱特性，因此适用于原先使用EB为染料的凝胶成像系统，用它替代 EB 时不需要更换成像系统。

产品特点：

高安全性：无致突变性，无致癌性。DNA Safe Dye (10000×)分子量约有1400，难以穿过细胞膜上的通道。DNA Safe Dye (10000×)带4个正电荷，与带正电荷的细胞膜相互排斥。
高灵敏度：低浓度样本可清晰显色。DNA Safe Dye (10000×)的检测灵敏度比EB高8-10倍，在检测低浓度、微量DNA或RNA方面比EB更佳，尤其对小分子量的DNA检测非常灵敏。鉴于 Super GelRed 的高灵敏性，建议减少 DNA 的上样量，推荐已知浓度样品的上样量为 50-200 ng/泳道（8 泳道的小胶孔），对于未知浓度的样品，尝试上样 2-3 μL。

高稳定性：微波炉加热，室温保存。染料无需低温冷藏，请于室温下储存，以避免沉淀，若发现沉淀，请将染料加热至 45-50 ℃，2 min，振荡溶解，不影响使用效果。

操作方法：

1.胶染法（用法同 EB）

（1）制胶时每 50 mL 琼脂糖凝胶中加入 5 μL DNA Safe Dye (10000×)核酸染料，并充分混匀。DNA Safe Dye (10000×)具有出色的热稳定性，可将试剂直接加入高温的凝胶溶液中，无需等待凝胶溶液冷却后再加入。也可采用将DNA Safe Dye (10000×)试剂预先与含有琼脂糖粉末的电泳缓冲溶液混合，加热制成）。

（2）按照常规方法进行电泳。

2.泡染法

（1）按照常规方法进行电泳。

（2）将DNA Safe Dye (10000×)储液稀释约 3,300 倍到 0.1 M NaCl 中，制成 3×染色液。（例如将15 μL DNA Safe Dye (10000×)储液，5 mL 1 M NaCl 加到 45 mL H₂O 中）。

（3）将凝胶小心地放入合适的容器中，加入足量的 3×染色液浸没凝胶，为了缩短泡染时间，染色液可以预先加热 至 70 ℃左右，然后放入凝胶，孵育 10 min 即可获得理想效果（若不加热，室温摇床孵育 30 min 即可，若为丙烯酰胺 凝胶，则需孵育 30 min 到 1 h，并随丙烯酰胺含量增加而延长）。泡染染料用量较多，单次使用的染色液可重复使用 3 次左右。3× DNA Safe Dye染色液可以大量制备，在室温下保存直至用完。

注：1. 如果总是看到条带弥散或分离不理想，建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。

2. 如果泡染染色后问题依旧存在，则说明问题与染料无关，请尝试：降低琼脂糖浓度、选用更长的凝胶、延长凝胶时间以保证边缘清晰或改进上样技巧。

注意事项：

使用胶染法时，经检测DNA Safe Dye (10000×)跟市面上的一些 DNA Ladder 存在不匹配的现象，因此我们推荐使用高品质 marker 品牌，如 US Everbright、Promega、Vazyme、TransGen 等。

储存：

室温长期保存。

常见问题：

1.胶染法中 DNA 条带弥散，拖尾?
（1）将 DNA 上样量减少至三分之一或五分之一。DNA Safe Dye (10000×)比 EB 更加灵敏，条带的弥散或拖尾可能是超载造成的。这是 DNA ladder 的常见现象，推荐使用我司提供的与DNA Safe Dye (10000×)匹配性较好的 DNA ladder。
（2）确保使用的染料终浓度为1×。
（3）用泡染法（后染）代替胶染法（前染）。
（4）使用低浓度的琼脂糖凝胶检测大片段 DNA。
（5）更换电泳缓冲液，TBE 缓冲液比 TAE 缓冲液的效果好。
（6）loading buffer 含有 SDS 可能会引起条带的弥散和拖尾，如果发生这种情况，建议使用泡染法。

2.DNA Safe Dye (10000×)是否可用于单链 DNA 或 RNA 染色？
DNA Safe Dye (10000×)可以用来染色单链 DNA 和 RNA，但是它对双链 DNA 的灵敏度是单链 DNA 或 RNA 的五倍。

3.DNA Safe Dye (10000×)与哪些 loadingbuffer 兼容？
我们通常使用含有 15% glycerol, 7.5% Ficoll 400, 0.05% Bromophenol Blue,and 0.1% Patent Blue VF 的 6× loading buffer。在内部测试中，包含 0.1%Orange G 的 6X loading buffer 在 Super GelRed  的前染和后染中都有良好。

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