简介：
5 × High GC & Long Fragment Buffer 是基因扩增的辅助试剂，主要应用于非特异性条带扩增严重、高 GC 含量模板（>70%）、 长片段（>4kb）的 PCR 扩增，可降低引物二聚体、减少非特异性扩增、提高扩增效率。5 × High GC & Long Fragment Buffer 会影响引物模板配对的稳定性，所以非必要情况无需添加。
应用：
非特异性条带扩增严重、长片段扩增（>4kb）、高 GC含量模板（>70%）扩增。
操作方法：
在 PCR 体系中加入 5 × High GC & Long Fragment Buffer 至浓度为 1× 即可，配制为如下反应体系：
1. 扩增>4kb 片段长度，按以下组分配制 PCR 反应液
Long Fragment Taq DNA Polymerase (5 U/μl) | 0.5 μl |
10× Long Fragment PCR Buffer | 5 μl |
5 × High GC & Long Fragment Buffer | 10 μl |
dNTP Mixture (2.5 mM each) | 4 μl |
模板 DNA | 2.5 ng |
上游引物（10 μM） | 2 μl |
下游引物（10 μM） | 2 μl |
ddH2O | Up to 50 μl |
2. 非特异性条带扩增严重、高 GC 含量模板（>70%），按以下组分配制 PCR 反应液
HotStart Taq DNA Polymerase (5 U/μl) | 0.5 μl |
10× HotStart PCR Buffer | 5 μl |
5 × High GC & Long Fragment Buffer | 10 μl |
dNTP Mixture (2.5 mM each) | 4 μl |
模板 DNA | X μl |
上游引物（10 μM） | 2 μl |
下游引物（10 μM） | 2 μl |
ddH2O | Up to 50 μl |
储存：
-20℃可保存 2 年。
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