简介：
对于测序、SNP检测、蛋白表达和基因功能研究等应用而言，高保真扩增是很关键的。Z5 Plus超保真DNA聚合酶是一种具有超高保真性能和卓越扩增活性的DNA聚合酶，它具有 3’-5’核酸外切酶的校正活性，保真度为Taq DNA聚合酶的100多倍。基于其扩增能力强、产量高、保真性高、特异性强等优势，可广泛应用于载体构建、突变修复、基因合成、DNA测序等高保真要求较高类型的试验。Z5 超保真 DNA聚合酶具有非常高的保真度，对长至10kb的片段、高GC含量模板具有非常高的扩增效率，大大了缩短扩增时间。
用途：
该酶扩增获得的产物不含有 “A”尾，可直接克隆于SupersmartTM ZERO-Blunt零背景平末端克隆载体（ZS-M16002）进行克隆测序，如需进行T/A克隆，需在PCR产物末端添加“A”后进行克隆。
单位定义：
一个活力单位即在 74°C条件下，30分钟内催化10 nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。
PCR反应性能：
以λDNA为模板，扩增15kb DNA片段；以人类基因组DNA为模板, 扩增8kb DNA 片段。
反应实例：
1. 按以下组分配制 PCR 反应液
Z5 Plus High-Fidelity DNA Polymerase (5 U/μl) | 0.2 μl |
10×PCR Buffer | 5 μl |
dNTP Mixture (2.5 mM each) | 4 μl |
* 1 模板 DNA | X μl |
上游引物（10 μM） | 2 μl |
下游引物（10 μM） | 2 μl |
ddH2O | Up to 50 ul |
* 1 模板 DNA 用量参数(50 μl 反应体系)
模板 DNA (目的片段≤10 kb) | 100-1000ng Genomic DNA |
5-30ng Plasmid DNA |
1-5μl cDNA from RT reaction |
2. PCR 扩增循环参数
循环数 | 温度 | 时间 |
1 st Cycle | 95°C | 2min |
25-35 Cycles | 95°C | 10s |
Tm | 20s |
72°C | 2kb/min |
Last Cycle | 72°C | 5min |
（1） 在以质粒为模板的情况下，可按照5kb/min设置延伸时间，在以基因组DNA和cDNA为模板条件下，可按照2kb/min设置延伸时间。
（2） 使用Z5进行PCR反应时引物长度通常在18~23bp为宜，GC含量 40~60%为最佳。GC含量超过65%以上的模板建议使用5XQ Solution（ZS-M-1058）。
（3）由于Z5 DNA 聚合酶具有较强的引物模板结合能力，通常情况下TM值较Taq DNA聚合酶高3~5°C。因此，退火温度可提高3~5°C。
储存：
-20℃可保存3年，避免反复冻融。
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