Superbrilliant 6分钟新鲜血液RNA提取试剂盒(ZS-M11016)

产品货号:ZS-M11016
产品规格:50T/100T/250T
产品价格:1898/3598/7980元
所属类别:RNA提取
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    简介:

     

    该提取试剂盒采用基于异硫氰酸胍/苯酚法的优化的独特的裂解液,RNA与硅胶膜离心柱特异地结合可快速高效从新鲜抗凝全血样本中纯化出高纯度的总 RNA,快速有效去除细胞中基因组DNA和蛋白质,使获得的RNA 纯度高,稳定性好。总RNA包括大于200个核苷酸的RNA(也常被称为总RNA)和小于200个核苷酸的小RNA(small RNA)。本试剂盒具有高效、快速、方便的特点,总时长仅需6 min左右。是目前国际上操作步骤最少、用时最短的血液RNA提取试剂盒之一所获得的RNA可直接用于反转录、基因克隆、定量检测、体外翻译、RNase protection assay, 也可用于基因表达芯片分析(microarray)、文库构建、杂交等多种分子生物学实验。

     

    注意事项:

     

    (1) 本试剂盒中的Washing Buffer 中已经加乙醇,无需单独添加。

    (2) Solution R1Solution R2均具有腐蚀性,注意防护。

     

    操作方法:

     

    1细胞分离

    ① 取一支15ml离心管,加入与样本量相等的Buffer LS(不足3ml加入3ml Buffer LS)。用吸管小心吸取血液样本加于Buffer LS的液面上,400g30-40min。(注:根据血液样本量确定离心条件,血液样本量越多,离心力越大,离心时间越长,具体离心条件需客户自行摸索,以达到最佳分离效果,但最大离心力最好不超过1200g)。

    ② 离心后,此时离心管中由上至下分为四层。第一层为血浆层(含血小板)。 第二层为环状乳白色淋巴细胞(单核/单个核细胞层)。第三层为透明分离液层。第四层为红细胞层(含大量中性粒细胞)。

    ③ 取第二层白色淋巴细胞环层,加入三倍体积的生理盐水或PBS混匀,60-250g,离心10min,弃去上清。

    ④ 5-8ml生理盐水或PBS混匀,60-250g离心10min,弃去上清。

    ⑤ 重复上一步,用30~100μl水或PBS重悬细胞沉淀。

    2)裂解/上柱(1.5ml EP 管中处理)

    加入120μl Solution R1漩涡混匀30s,加入500μl Solution R2上下颠倒混合均匀,倒入吸附柱中。13000rpm 离心30s,倒掉废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。

    3)洗涤和洗脱


    向吸附柱中加入500μl RNA Washing Buffer13000rpm 离心15s。重复此步骤一次。将吸附柱重新放回离心机,13000rpm 空离心1min,将残留的乙醇彻底甩干。 将吸附柱芯放入到 1.5 mL Nuclease Free 收集管中,向吸附柱芯中加入20~50μl Nuclease Free H2O,室温放置1min13,000rpm 离心1min,洗脱液即为提取的RNA,冷冻保存。


     

    QQ图片20201027095926.png 

    Fig 1.使用SuperbrilliantTM 6 min Fresh Blood RNA Extraction Kit提取新鲜全血RNA细胞分离示意图。

     


    图片3.png 


    Fig 2.使用SuperbrilliantTM 6 min Fresh Blood RNA Extraction Kit提取新鲜全血RNA中实基因6分钟耐热首链cDNA合成试剂盒反转的cDNA为模板,快速SYBR Green qPCR预混液进行荧光定量PCR检测Actin基因

     

    储存:

     

    Buffer LS4℃保存,其他组分室温避光保存,试剂盒保质期2年。

     

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