简 介：
本产品是专为两步法RT-PCR第一步实验配制的cDNA第一链合成试剂盒。本试剂盒采用稳定高效的反转录预混体系5× Fast Plus RT Master mix进行RNA的反转录反应，使用时只需加入模板、引物和 RNase Free H2O即可，大大简化了操作过程、提高了效率、减少了操作过程中的人为误差和RNA的降解可能。该预混体系包含点突变致RNase H活性缺失的MuLV V Reverse Transcriptase反转录酶、dNTP、反应Buffer和RNase Inhibitor。
该试剂盒采用的反转录酶去除了RNase H活性，以避免反转录过程中降解RNA。同时经过突变文库筛选，使得其更强热稳定性，耐受50℃以上高温反应，在60℃ 条件下仍具有30%以上活性，与本公司MuLV IV Reverse Transcriptase反转录酶相比提高逆转录效率和反应速率。该酶采用高温反转录时更充分打开RNA二级结构，提高对复杂 RNA模板的扩增性能、提高反转录cDNA的长度和产量，从而提高后续检测的灵敏度。本品能利用极低量RNA合成cDNA 第一链，起始样本量可低至pg级。MuLV V Reverse Transcriptase反转录酶与RNA亲合能力更强，经过基因改造后含有快速合成结构域，将反转录酶的延伸速度提高了3-4倍，因此适用于快速反转录反应；加入科学优化反应 Buffer使其获得更高产量的cDNA，从而提高后续检测的灵敏度。合成的第一链cDNA 可广泛用于2nd Strand的合成、杂交、PCR扩增、Real-Time PCR 反应、以及全长cDNA文库的构建等。
应用：
（1）该制品可有效反转录 mRNA、tRNA、LncRNA、ncRNA等
（2）该制品不可反转录 microRNA、病毒 DNA/RNA 样品
操作方法:
1. 按以下组分配制反转录反应液
Total RNA or Poly(A) RNA | 0.1-2 μg |
5×Fast Plus RT Master mix | 4 μl |
*20×Oligo dT (25) & Random Primer | 1 μl |
Rnase Free H2O | Up to 20 μl |
*注：反转录引物可根据需要改用特异性引物。
2.反应程序
50°C 5min（第一链cDNA合成）
95°C 1 min（失活MuLV）
3. 采用0.25-2μl反转录产物，作为后续定量PCR或PCR的扩增模板即可。
储存：
请置于-20°C，可保存 3 年；避免反复冻融。
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400-996-3155
