简介：
本酶是将单链或双链 DNA 同等程度的随机分解，生成具有 5′-P 末端寡核苷酸的脱氧核糖核酸内切酶。其原理为DNase Ⅰ水解磷酸二酯键产生带有5'-磷酸基团和3'-OH的单核苷酸或寡核苷酸。DNase I活性依赖于钙离子，并能被镁离子或二价锰离子激活。镁离子存在条件下，DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点；二价锰离子存在条件下，DNase I可在同一位点剪切DNA双链，形成平末端，或1-2个核苷酸突出的粘末端。由于DNase I (with Rnase Inhibitor)
中Protease已几乎被完全去除，从而提高了该酶在pH中性区域的稳定性。此外该酶中添加了RNase Inhibitor，用于抑制RNA样品中残留的RNase核酸酶，因此可以有效抑制 RNA 提取过程中RNase酶对RNA的降解。Stop Buffer终止反应后，可通过一步加热失活DNase I活性。
*该DNase I (10 U/μl)中含有20 U/μl的Rnase Inhibitor，故进行消化试验时不需要再额外添加 Rnase Inhibitor。
活性定义：
以小牛胸腺DNA为底物，在 25℃、pH5.0 的条件下，1分钟内使反应液的 260 nm 吸光度增加0.001 所需要的酶量定义为1个活性单位（Kunitz Unit）。
纯度：
10 U的本酶和1 μg的16S, 23S rRNA在37℃、pH7.5的条件下反应 1 小时，RNA的电泳谱带不发生变化.
应用：
去除RNA样品中的DNA污染。
操作方法:
（去除RNA中的基因组DNA污染）
1. 按以下组分配制反应体系
RNA | 10~50 μg |
10× Reaction Buffer | 5 μl |
Rnase Free DNase I (10 U/μl) | 1 μl* |
Rnase Free H2O | Up to 50 μl |
*若RNA样品中含有超过5 μg基因组DNA污染，请使用2 μl该酶。
2. 37°C孵育10min以消化去除基因组DNA。
3. 孵育完毕后加入5 μl 10× Reaction Stop Buffer，混合均匀室温放置1min，并置于75°C 10min加热失活DNase I。样品可直接用于下一步反转录等试验。
注意事项：
1）通常加热方法即可失活 DNase I。如需要去除残留的变性蛋白，可在 37°C 消化完毕后使用酚氯仿抽提并沉淀RNA样品（不进行加热操作）。
2）10× Reaction Stop Buffer中含有螯合剂用于去除二价阳离子，进行加热失活前，必须加入5 μl 10× Reaction Stop Buffer并混合均匀，再进行热失活，否则会导致RNA降解。
3）处理完毕的RNA样品进行一步反转录反应时，添加量需要<20%（如20 μl的反转录体系中加入量要<4 μl）
储存：
-20°C可保存2年。
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