Superbrilliant® TRI LS RNA裂解液 (ZS-M11007)

简介：

Superbrilliant^® TRI LS RNA 裂解液含有酚、异硫氰酸胍和其它成分，是一种专门用于从液体样本（如细菌、病毒、酵母、细胞、血液、组织悬液）中提取高质量RNA的试剂。与TRI RNA Reagent相比，唯一区别在于其组分浓度，Superbrilliant^® TRI LS RNA裂解液是一种用于提取液体样本RNA的浓缩试剂，故提取相同量样本所需的用量相对较少。

样品在 Superbrilliant^® TRI LS RNA裂解液中能够充分被裂解，在样品匀浆或裂解过程中，它可保持 RNA 的完整性，同时裂解细胞，溶解细胞内含物，提取过程方便快速，洗脱得到分子量大于200 bp的高纯度RNA，整个操作在一小时内便可以完成。应用Superbrilliant^® TRI LS RNA裂解液获得的总RNA含蛋白质和DNA污染极少，可用于 Northern Blot、反转录、ployA 筛选、RNase 保护分析和基因克隆等后续分析。 

操作方法：

实验前准备：

RNA 制备的关键是要抑制细胞中的 RNA 分解酶和防止所用器具及试剂中的RNA分解酶的污染。因此，在实验中必须采取以下措施：戴一次性干净手套；使用RNA操作专用实验台；在操作过程中避免讲话等等。通过以上办法可以防止实验者的汗液、唾液中的RNA分解酶的污染。

注意事项：

1. 尽量使用一次性塑料器皿，若用玻璃器皿，应在使用前用0.1% DEPC水溶液在37℃处理 12h，然后在120℃高压灭菌30 min以除去残留的 DEPC。

2. 用于RNA实验的试剂，须使用干热灭菌（180℃，60 min）或DEPC水处理相关容器，使用的无菌水须用0.1%的DEPC处理后再进行高温高压灭菌。

3. RNA实验用的试剂和无菌水都应专用，避免混用后交叉污染。

样本量及RNA产量

TRI LS RNA裂解液使用方法

                                    T公司                          中实同创        

miR-21    

miR-16    

Fig 1.使用TRI LS RNA裂解液提取小鼠的血清RNA，针对miR-21, miR-16进行qPCR检测。

注意事项：

(1)请勿应用该试剂直接处理大块固体组织，否则会影响RNA的产量。

(2)该试剂含有强变性剂，请勿直接于皮肤接触或吞咽，若接触到皮肤或眼睛请尽快到医院处理。实验时务必穿实验服，戴手套。

自备试剂：

氯仿，异丙醇，70％乙醇（DEPC 水配置），RNase Free H₂O。

储存：

2-8℃避光保存，可保存2年。

常见问题分析：

 1. 抽提率低。可能原因：（a. 样品裂解或匀浆处理不彻底；b. RNA 沉淀未完全溶解）

2. A260/A280<1.65。可能原因：（a. 检测吸光度时，RNA 样品没有溶于水，而溶于TE中；b. 样品匀浆时加的组织量过多；c. 分层后，吸取上清液不足 500μl；d. 吸取水相时混入了有机相）

3. DNA 污染过多。可能原因：（a. 样品匀浆时加的试剂量太少或组织量过多；b. 样品中含有有机溶剂）

解决方法：使用该试剂通常基因组DNA污染含量<0.1ng/μL，如需要彻底去除DNA的污染，请使用Superbrilliant^® DNase I (含RNA酶抑制剂)（ZS-M11009）消化去除基因组 DNA 污染。

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