简介：
少量RNase在RNA制备过程中引入并与分离RNA共纯化，从而污染下游应用。 此外，污染也可能通过实验过程中使用的枪头、试管（离心管）和其他试剂引入。本产品系重组表达得到的RNA酶抑制剂，可与RNase非共价结合，形成1:1的复合物，具有广谱的RNase抑制活性。尿素及巯基类试剂可以解离本品与RNase形成的复合物，使RNase复活而RNase Inhibitor不可逆失活，因此反应体系中应避免尿素及巯基类试剂存在。RNase Inhibitor对RNase A、RNase B、RNase C和人胎盘核糖核酸酶的抑制能力极强，其Ki值低至约为4×10-14 M。通常抗体和抗原的亲和常数仅为10-6-10-9 M。并且RNase Inhibitor和这些RNA酶的结合是非常快速的，几乎在加入的瞬间就会和这些RNA酶形成复合物从而抑制其酶活性。
单位定义：
抑制5 ng RNase A 的50%活性所需的RNase Inhibitor量定义为一个活性单位。
应用：
cDNA合成反应；体外无细胞系统转录或翻译；提高多聚核糖体的产量和活性。
使用方法：
1. 按以下组分配制反应体系
MuLV Reverse Transcriptase | 0.5-1 μl |
10×RT Buffer | 2 μl |
dNTP Mixture (10 mM each) | 1 μl |
Total RNA or Poly(A) RNA | 0.1-2 μg |
20×Oligo dT (25) & Random Primer * | 1 μl |
RNase Inhibitor (40 U/μl) | 0.5 μl |
RNase Free H2O | Up to 20 μl |
*注：Oligo dT(25)使用浓度为20~50 μM, 如使用Random9随机引物可使用125 μM，基因特异性引物可使用5 μM。
2．在PCR仪上按下列条件进行反转录反应
30°C 15 min
55°C 30~60 min
85°C 10 min
4°C For ever
3. 反转录所得的cDNA可直接用于PCR反应或储存于-20°C。
储存：
-20°C可保存2年。
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400-996-3155
