Supersmart TaqMan RNU6B定量PCR探针

简介：

Supersmart^TM 20×miRNA TaqMan Assay，含有特异性的正向miRNA引物和接头引物进行PCR扩增，检测荧光基团采用FAM标记的特异性miRNA TaqMan探针（原理见图1）。配合Superbrilliant^TM TaqMan miRNA定量PCR预混液可以特异性、高灵敏度的检测低至100个细胞的miRNA分子。Supersmart^TM TaqMan miRNA定量PCR探针共有一万余种，编号为ZS-MT-XXXXX，每一个mircoRNA分子对应一个miRNA TaqMan Assay（包含特异性的TaqMan探针、正向引物、反向引物），可在miRNA TaqMan Assay.xls中查询。如果您研究的mircoRNA分子不在我们的列表中，请来信咨询，我们将及时给您优化设计。

内参基因可选择使用：

（1）Supersmart^TM TaqMan RNU6B定量PCR探针(货号：ZS-MT-RNU6B)适用于人、鼠等哺乳动物组织、细胞样品；

（2）Supersmart^TM TaqMan miR-16定量PCR探针(货号：ZS-MT-hsa-miR-16)适用于来源于人、鼠全血样品。

图1  TaqMan miRNAs定量检测原理

组分：

操作方法

1. 配制反应体系

配合Superbrilliant^TM TaqMan miRNA定量PCR预混液使用，货号：ZS-M15002

根据机型选择步骤 A 或 B

A: 需要添加 ROX 染料进行反应孔间信号矫正的 Real-Time PCR 仪，包括：ABI 7000/7300/7500/7900 等。按照如下组分配制20 μl PCR反应体系：

注意：cDNA模板来自于miRNA反转录试剂盒（TaqMan法）反转录产物(货号：ZS-M15003或ZS-M15004)。

B:无需添加 ROX 染料进行反应孔间信号矫正的 Real-Time PCR 仪，包括：LightCycler (Roche)；MyiQ 2、CFX96 Real-Time PCR(Bio-Rad)；Line-Gene(杭州博日)等。按照如下组分配制20 μl PCR反应体系：

注意：cDNA模板来自于miRNA反转录试剂盒（TaqMan法）反转录产物(货号：ZS-M15003或ZS-M15004)。

2. 进行Real-Time PCR反应

通常采用两步法，程序如下：

（收集信号采用FAM染料通道）

储存：

可避光置于-20℃，保存2年，避免反复冻融。

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