简介：
本试剂盒采用 LAMP 环扩增技术配合可视化技术，进行 2019-nCoV 的 RNA 病毒检测。肺泡灌洗液、拭孖浸泡液等样本可直接检测(不需要核酸提取)，唾液、痰液、血清、血浆、含高盐病毒保存液样本需要核酸提取。该试剂盒的灵敏度为单copy（检出率 100%），假阳性比例<5%。
该试剂盒的靶标基因为 N 蛋白，靶标序列如下:
TCTCACTCAACATGGCAAGGAAGACCTTAAATTCCCTCGAG
GACAAGGCGTTCCAATTAACACCAATAGCAGTCCAGATGAC
CAAATTGGCTACTACCGAAGAGCTACCAGACGAATTCGTGG
TGGTGACGGTAAAATGAAAGATCTCAGTCCAAGATGGTATTT
CTACTACCTAGGAACTGGGCCAGAAGCTGGACTTCCCTATG
GTGCTAACAAAGACGGCATCATATGGGTTGCAACTGAGGGA
GCCTTGAATA
组分：
名称 | 数量 |
LAMP OG Reagent | 100T |
2xLAMP Buffer | 1ml |
nCoV OG LAMP Assay | 100T |
Nuclease Free H2O | 1.25 ml |
NCoV Positive standard | 100T |
关于样本的使用说明：
由生理盐水灌洗的肺泡灌洗液，可直接放入到反应体系中使 用，不需要核酸提取。(2)咽拭孖、肛拭孖，可使用 0.5 ml 的 ddH2O (或 1640 培养基、 生理盐水)浸泡后直接使用，不需要核酸提取。 (3)唾液、痰液、血清、血浆、高盐病毒保存液制作的样本，必须核酸提取后再使用。
使用方法：
1. LAMP OG Reagent 为干粉形式，包含 Bst IV DNA 聚合酶、 dNTP 等，在未溶解前，该制品可-20°C长期保存，并可室温运输， 性能无下降。使用前每瓶用 1 ml 的 2xLAMP Buffer 溶解后，可 立即使用，剩余试剂可在-20°C保存 1 个月，在-60°C以下长期保存。
2. OG 染料已经预先加入在 EP 管盖上，为干粉形式，其牢固的结合在管盖上，仅有反应完毕后，将 EP 管倒置后才能将其溶解，溶解后其将立即终止 LAMP 反应，并与 LAMP 反应产物形成鲜亮的 绿色可见光。在配制反应液和反应过程中务必不能将 EP 管盖上的染料混入反应液中，否则会导致 LAMP 反应终止。
3. nCoV OG LAMP Assay 为干粉形式，该制品可-20°C长期保存， 并可室温运输，性能无下降。使用前每瓶用 0.5 ml 的 ddH2O 吹打溶解后，可立即使用，剩余试剂可在-20°C保存 1 个月，在-60°C 以下长期保存。
4. 配制反应体系在本试剂盒提供的 0.2ml EP 反应管中加入下述试剂
溶解后的 LAMP OG Reagent
10ul
溶解后的 nCoV OG LAMP Assay
5ul
检测模板 5ul
全部试剂加入完毕后，轻弹 EP 管底部后，再盖上含 OG 染料的 EP 管盖(盖上管盖后务必不能再剧烈混合与倒置，以防止将管盖上的 OG 染料溶解，OG 染料一旦混入反应液中将会终止 LAMP 反应)。
5. 反应体系配好后，静置于 60°C 反应 40min。
6. 观察结果
反应结束后，将所有反应管从水浴锅取出，室温冷却 2 分钟， 并用力再次压紧管盖，以防止溶液从反应管泄露。反应管外侧多余的水，可用纸巾擦拭干净。将反应管倒置过来，轻甩一次，将反应液甩至管盖上，覆盖 OG 染料，倒置 30 秒(可 倒置在纸巾上)。管盖上的 OG 染料溶解后，再将反应管正置过来，轻甩一次，将溶液甩至管底部。肉眼观察反应液颜色 变化进行结果判读(可拍照留存数据)。
7. 结果判读
| 阴性对照 | 阳性对照 | 检测样品 | 判读结果 |
A | 橙黄色 |
| 绿色 | 阳性(+) |
B |
| 绿色 | 橙黄色 | 阴性(-) |
C | 绿色 |
| 绿色 | 不能判断为阳性，需重检测 |
D |
| 橙黄色 | 橙黄色 | 不能判断为阴性，需重检测 |
特殊说明:(1)该方法灵敏度实际测试达到单 copy 灵敏度，因此不存在漏检(假阴性)情况。但该方法存在一定比例的假阳性 (<5%)，因此阳性样品，建议进行复检，复检仍然为阳性，可判读为阳性，否则判读为阴性。(2)阳性对照在单独检测管中加入 5μl 本试剂盒提供的阳性标准品。(3)阴性对照可采用 ddH2O 或病毒 保存液，用量同样为5μl。
储存：
长期储存置于-20°C以下，可保存3年；短期使用置于 4°C（12个月）保存。
400-996-3155
