Superbrilliant LAMP扩增检测试剂盒（基于浊度指示）(ZS-M17002)

简介：

Bst DNA聚合酶是Bacillus stearothermophilus DNA聚合酶的一部分，具有很强的链置换活性，以及5’→3’的DNA聚合酶活性，因此可以应用于LAMP( Loop-mediated isothermal amplification)检测实验。

LAMP是一种新型核酸扩增技术，采用4或6条能够识别目的基因上的6个特异区域的引物，依赖与Bst DNA聚合酶的强链置换活性，在30~60分钟内DNA扩增可达10⁹~10¹⁰倍。

在LAMP的高效反应过程中会产生大量的焦磷酸根离子，其与镁离子结合形成焦磷酸镁白色沉淀，因此在实验过程中可通过检测反应液的浊度变化进行实时定量检测。也可在反应结束后肉眼直接观察焦磷酸镁沉淀，根据是否形成白色沉淀来判断反应是否发生。

 反应实例：

1. 按以下组分配置反应混合液

2. 反应体系配好后，充分混匀并短暂离心，置于60~68°C进行反应，连接LAMP实时浊度仪，对浊度变化进行实时检测。也可肉眼分别于30min、45min、60min观察浊度变化。必要情况下85°C热失活5min（可选）。

 LAMP实验的条件优化：

（1）10×LAMP Primer Mix配置

（2）Betain使用浓度

（3）Turbidity LAMP对照设置

（4）反应温度设置

通常反应温度为65°C，由于引物的效率差异，可在60、63、65、68°C进行适当调整。首次实验建议采用60、65°C

注意事项：

(1). 为了减少交叉污染，请分区操作（试剂和模板DNA的配置操作最好在不同区域中进行）。

(2).实验时，所需模板量取决与样品类型（0.1ng~100ng），可先进行预实验确定模板量。

(3). 各区物品均为专用，不可交叉使用，防止污染。

(4). 实验过程中应穿工作服，带手套，建议使用带滤芯的一次性吸嘴。

储存：

-20℃可保存3年。