简介:
本试剂盒采用高效、专一结合核酸的独特缓冲系统,样品基因组DNA提取操作过程无需离心、无需酚/氯仿抽提等繁杂抽提步骤。是一种可以快速从组织、小鼠尾部、毛发、细胞培养液、唾液、精液等动物组织中提取基因组DNA并进行后续PCR扩增进行检测的试剂盒。
该试剂盒搭配高耐受杂质酶预混液Superbrilliant® 第三代ZAPA SYBR Green qPCR预混液(2×) (货号:ZS-M13002)或Superbrilliant® 第三代ZAPA TaqMan探针法qPCR预混液(2×) (货号:ZS-M13003),直接用于PCR扩增、定量分析等实验。提取的基因组DNA置于-20℃至少保存3个月,可用于50-100个PCR反应。
产品特点:
高效的快速DNA释放剂:采用DNA释放剂进行样本的快速前处理(约需要5 min,可高通量操作)。DNA释放剂的前处理,使得制备的DNA模板可以进行多次、多基因扩增,并长期保存DNA,经DNA释放剂处理的样本,在室温条件下放置1个月,无任何后续影响,-20℃可长期保存。
操作方法:
一、加热法:
1. 取样本置于200 μl的EP管中(不同的组织取样方法不同)。
a. 动物组织:以高压灭菌的手术剪取新鲜或冰冻的动物组织1-10 mg,立即置于50 μl 的快速 DNA 释放剂 A 中,短暂涡旋务必使快速 DNA 释放剂 A覆盖组织。
b. 小鼠尾部:以高压灭菌的手术剪取小鼠尾部,不要超过 5 mg,立即置于50 μl 的快速 DNA 释放剂 A中,短暂涡旋务必使 快速 DNA 释放剂 A 覆盖小鼠尾部组织。
c. 毛发:取3-10根带有毛囊(重要)的毛发,取其根部置于50 μl 的 快速 DNA 释放剂 A 中,短暂涡旋务必使 快速 DNA 释放剂 A 覆盖毛发根部。
d. 唾液或口腔黏液:吸取 15 μl 的唾液或口腔黏液置于 50 μl 的 快速 DNA 释放剂 A中,短暂涡旋以充分混匀。
e. 细胞培养液:吸取 15 μl 的细胞培养液(100-10,000 个细胞)置于50 μl的
快速 DNA 释放剂 A 中,短暂涡旋以充分混匀。
2. 将加有样品和 快速 DNA 释放剂 A 的EP管置于PCR仪上98℃加热5 min。
3. 加热结束后,加入50 μl的快速DNA释放剂B,振荡均匀后短暂涡旋混匀。
二、钢珠研磨法:
1. DNA释放:取1-10 mg动物组织等材料,放入到2 ml EP管中,加入 250 μl 快速 DNA 释放剂 A 和 2-3 粒钢珠,研磨 1-2 min 成浆体状。
2. 研磨完毕后加入 250 μl 快速DNA 释放剂 B,混合均匀,即可进行后续PCR实验。
储存:
(1)长期保存请储存于-20℃,避免反复冻融,可保存2年。
(2)若短期使用请置于 4℃可放置3 个月。
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