简介:
Western通用型抗体洗脱缓冲液,用于 Western Blot中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western Blot 中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后,有时还需要检测 Actin、Tubulin等内参蛋白或检测其它蛋白进行比较。Western通用型抗体洗脱缓冲液可变性已经结合的抗体,使其失活,从而将同一张膜再用于其它抗体的杂交。使同一张膜可进行多次抗体检测,无需反复电泳和转膜,节省样品和时间。与其它类型的一抗二抗洗脱缓冲液相比,该试剂采用温和洗涤配方,不破坏抗原,处理过程中膜上抗原不丢失,因此可重复应用的次数更多、灵敏度更高。
特征:
操作简单快速
不会造成抗原蛋白的损失。
操作方法:
(1) 将杂交完毕的膜置入蒸馏水中,室温漂洗 5min。
(2) 漂洗结束后,弃去蒸馏水。
(3) 加入适量 Western通用型抗体洗脱缓冲液(至少可覆盖膜表面),室温孵育 15min。
(4) 孵育结束后,弃去Western通用型抗体洗脱缓冲液。
(5) 加入适量蒸馏水,室温漂洗 5min×4次;漂洗结束后弃去蒸馏水。注意:每次漂洗务必将废液倒干净。
(6) 然后进行封闭等后续操作,直至完成Western Blot。

A B
Fig1. 裂解MDA-MB-231细胞,A,检测N-Cad蛋白后用Superbrilliant® WB通用型抗体洗脱缓冲液洗膜。B,再检测EZH2蛋白。
注意事项:
该试剂为强烈的氧化剂,实验时务必做好防护工作。如试剂接触到皮肤,请用大量的水冲洗,并尽快就医。
储存:
室温可保存2年。
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