Superbrilliant® 2×ZAPA超保真PCR Mix(with dye) (ZS-M12008)

简 介：

ZAPA High Fidelity DNA 聚合酶是一种新型的高保真酶体系，并加入了增强的延伸结构，使其具有280 倍于普通Taq酶的超保真性能，与其他高保真酶相比具有行业领先性。该酶具有 6kb/min 以上的扩增速度，扩增基因组或cDNA可达10kb，扩增质粒或噬菌体DNA可达20kb。ZAPA High Fidelity DNA 聚合酶具有长片段扩增能力、高扩增成功率、高产量。该酶经化学修饰，采用专有的热启动技术确保 50℃以下 100%无活性，因此可在室温建立反应体系。热启动配方中，酶是结合在一个特定载体上，使其在第一部变性之前一直保持灭活状态，这样就消除了反应设定和启动过程中非特异性启动导致的产物增加，提高 PCR 扩增的特异性、PCR 产物的产量、 准确性和精确性。该试剂盒独特的反应缓冲液，可在宽范围。中得到良好的扩增结果、检测灵敏度更高、信号更强。

当执行高保真PCR时，在产生足够的产物用于克隆的前提下，减少循环数是很重要的。额外的循环数增加了产量却降低了保真性：反应早期少量的错配都是固定的，此后在每个连续循环中都得到放大，在随后的周期，任何额外的错误都将导致突变扩增的比例增加。该 PCR Mix 具有 5’-3’的聚合酶活性、强 3’-5’的外切酶活性，产物为平末端，因此产物可用于平端克隆。该制品中已经含有溴酚蓝染料，PCR 扩增完毕后可直接点样于琼脂糖凝胶，无需再加入 DNA Loading Buffer。

特点和用途： 

（1）超保真扩增：其具有280 倍于普通Taq酶的超保真性能，是载体构建、点突变、NGS 模板扩增、基因合成的最佳用酶。

（2）长片段扩增能力：使用该酶可轻松扩增 8kb 的基因组片段，20kb 的λ DNA，8kb 的 cDNA。

（3） 快速 PCR：该酶具有 6kb/min 以上的扩增速度，可显著的缩短 PCR 的扩增时间，在常规测试条件下，10s 的延伸时间可完成 1kb 的基因组 DNA 扩增。

（4）高 PCR 成功率：与其它类型的 PCR 扩增试剂对比中，2×ZAPA High Fidelity PCR Mix 表现出最佳的 PCR 扩增成功率。

使用方法: 

1. 按下表配制反应体系并混合均匀：

*模板DNA用量参数（50μl反应体系)

模板DNA                    5-250 ng Genomic DNA

(目的片段≤20 kb)       0.1-10 ng Plasmid DNA

                                   1-2 μl cDNA from RT reaction

2. PCR 扩增循环参数

具体程序根据实际扩增情况而定。

3. 电泳：1% 琼脂糖凝胶电泳，上样 5 μl，电泳结束在紫外灯下检测条带。

4. 注意事项：(1) 当模板 GC 含量>70%时，请添加 Superbrilliant® 5×高GC含量模板、长片段辅助buffer（Cat. No.: ZS-M12012）。(2) 当扩增片段<1kb 时， 延伸时间可直接使用 15s，当扩增片段＜3kb 时,延伸时间可直接使用 30s，当扩增片段>3kb 时，请按照 2kb/min 的延伸时间进行设置。在按照 2kb/min 设置延伸时间的条件下能获得最高的产量。

         M      ZAPA超保真           ZAPA全能           Z5超保真            Z6超保真        

         菌液A   菌液B   菌液A   菌液B   菌液A  菌液B  菌液A  菌液B

Fig 1.以细菌基因组DNA为模板，应用 Superbrilliant^®  2×ZAPA High Fidelity PCR Mix(with dye)、 Superbrilliant^® 2×ZAPA3G Universal PCR Mix (with dye)、

 Superbrilliant^® Z5 HotStart HiFi PCR Master Mix和  Superbrilliant^® Z6 HotStart HiFi PCR Master Mix，分别扩增16S片段（1300bp、200bp），每个片段2个复孔，1%琼脂糖电泳，M为DM2000 Marker。

储存：

长期储存置于-20°C以下，可保存2年；短期使用置于 4°C，可保存3个月。

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批号 BG10001 -001