简 介:
Safe Gold核酸染料(10000×)是本公司利用自主技术开发的新型荧光核酸染料。这种独特的油性分子是花菁染料,不易挥发升华,AMES实验显示在凝胶染色浓度下没有诱变性,具有使用安全、检测灵敏等特点,可以作为各种核酸电泳的染色剂,适用于各种片段大小染色,可完美替代致癌物溴化乙锭EB,与标准凝胶成像系统和可见光激发的凝胶观察装置完美兼容。Safe Gold核酸染料(10000×)核酸复合物的最大吸收波长~495 nm 和 300 nm,最大发射波长~537 nm。本公司独特的工艺使得Safe Gold核酸染料(10000×)获得比ZS-M18007 Superbrilliant® SYBR Safe核酸染料(10000×)更高的灵敏度。
产品特点:
1.安全无毒:独特的油性大分子特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内,该染料的诱变性远小于EB。
2.灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的没有任何影响。
3.稳定性高:适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶;室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定,耐光性强。
4.信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。
5.操作简单:在预制胶和电泳过程中不降解,可直接用可见光凝胶透射仪观察。
6.适用范围广:可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳;可用于dsDNA、ssDNA 或RNA 染色。
7.兼容性广:适用于使用254 nm 激发的紫外凝胶成像系统或蓝色可见光激发的凝胶观察装置。与SYBR Green 的光谱相似,灵敏度相当,并且性质更稳定。
操作方法:
一、胶染法
1.制胶:按常规操作,制备琼脂糖凝胶,加入浓缩的10,000x Safe Gold Nucleic Acid Dye,使其在凝胶中的终浓度为1x(例如:制备50 ml的凝胶,加入染料5 µL),摇匀倒胶。
2.按常规方法进行电泳(染料不影响DNA迁移)。
3. 使用凝胶成像仪观测结果。
二、泡染法
1. 制胶:按常规操作,制备琼脂糖凝胶,不加核酸染料。
2. 按常规方法进行电泳。
3.用H2O将10,000xSafe Gold Nucleic Acid Dye储液稀释约3,300倍到0.1M 的TAE或者TBE中,制成3x染色液。
4.将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙烯容器中。缓慢加入足量的3x染色液浸没胶。室温振荡染色30 min左右。
5. 使用凝胶成像仪观测结果。
储存:
2-8℃避光干燥可保存12个月。
注意事项:
1.由于Safe Gold核酸染料(10000×)具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷却。摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将Safe Gold核酸染料(10000×)储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。Safe Gold核酸染料(10000×)兼容所有常用的电泳缓冲溶液。
2. 如果条带总是弥散或分离不理想,请使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度;选用更长的凝胶;延长凝胶时间以保证边缘清晰;改进上样技巧或选择泡染法染色。
3.对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。
4.Safe Gold核酸染料(10000×)对玻璃器皿和非聚丙烯材料具有一定的亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。
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